細(xì)胞凍存技術(shù)作為一種保存細(xì)胞的有效方法,在生物學(xué)領(lǐng)域已有深入廣泛的應(yīng)用。因為正常情況下,直接冷凍細(xì)胞會產(chǎn)生冰晶對細(xì)胞造成傷害,從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。所以需要通過添加冷凍保護劑配制
埃澤思細(xì)胞凍存液,來保護細(xì)胞。
現(xiàn)在細(xì)胞凍存所使用的細(xì)胞凍存液都是經(jīng)過嚴(yán)格的配制之后才可以使用的,凍存液的配制方法可以說是很多相關(guān)教學(xué)中必學(xué)的內(nèi)容之一,不過還是有很多的實驗人員在配制的時候會容易出現(xiàn)一些比例不調(diào)的現(xiàn)象產(chǎn)生,那么,這凍存液怎么配?使用的時候應(yīng)該注意什么呢?
埃澤思細(xì)胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清,可以現(xiàn)用現(xiàn)配。除了這個方式,還可選擇20%的DMSO機上80%的小牛血清,配成兩倍的儲存液,在使用時細(xì)胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用,特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環(huán)境中保存。
使用埃澤思細(xì)胞凍存液需要注意以下幾點:
1、在使用凍存液前,需要確保凍存液已經(jīng)*融化,并要輕輕的混勻。對融化后的凍存液要置于4℃的環(huán)境中保存。
2、使用凍存液之前應(yīng)該確保凍存前的細(xì)胞生長情況比較良好,比如說細(xì)胞需要處于對數(shù)生長期,并且凍存的時候存活率大于90%。
3、在使用細(xì)胞凍存液期間,為了保證可以發(fā)出揮理想的效果,建議將細(xì)胞凍存在液氮之中,這樣可以長時間的進行保存。如果說將細(xì)胞置于-80℃的環(huán)境下保存,那么保存的時間大約為1年。
4、凍存液如果需要做標(biāo)記的話,要使用耐受有機溶劑的馬克筆進行標(biāo)記,以防被酒精或異丙醇等擦掉,不能辨識。
需要注意的是,埃澤思細(xì)胞凍存液只對于專業(yè)人員的科學(xué)研究所使用,切記不可用于臨床診斷或者進行治療,更不得用于食品或藥品,不能夠存放于普通的住宅內(nèi)。在使用凍存液期間,為了安全健康,應(yīng)該穿著實驗服并戴一次性手套進行專業(yè)操作。