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TECHNICAL ARTICLES液氮罐如何驗證?
液氮罐(Liquid)不管在世界各國,都早已被運用在很多的醫(yī)藥學行業(yè)里,在醫(yī)療界關鍵運用于超低溫(Lowtemperature)儲存干細胞(cell),血液樣版,冷藏(freezing)試管胚胎,及其人體冷凍(人體器官)等技術(technology)的實時控制都*它,那么貯存液氮罐又有什么特殊要求呢?
1:液氮罐主要用途是什么呢?
液氮罐主要是用來儲存液氮,用于后期的低溫實驗或儲存需要低溫保存的樣品如細胞、組織等(用于室內液氮的靜置貯存,不宜在工作狀態(tài)下作遠距離運輸使用)。
2:為什么液氮罐要做溫度分布驗證呢?
液氮罐主要是用來冷凍保存樣品,但是液氮的易揮發(fā)性、箱體的密封性等會對液氮罐的液氮量有較大的影響,我們都知道液氮的溫度是-196℃,但是在液氮罐中不止存在液氮,還存在液氣混合相,再往上還有氣相,這里面的溫差巨大,那么如何保證液氮在消耗的過程中依然可以保證足夠的低溫呢,這就需要用液氮罐驗證的數(shù)據(jù)來說話。 液氮驗證的數(shù)據(jù)來源于空載和滿載,在空載的狀態(tài)下,液氮的消耗量較低,所以一般數(shù)據(jù)有24h就可以,但是在滿載的狀態(tài)下,液氮的消耗量是大于空載的,所以我們一般建議滿載至少48h。
3:液氮罐溫度監(jiān)控探頭和溫度分布探頭確認
對于氣相罐而言,液氮罐設備監(jiān)控探頭至少應有一個位于裝載區(qū)域靠近罐體部位置,若有多個監(jiān)控探頭的液氮罐,建議罐體部和底部至少放置一個探頭。在實驗中,溫度的探頭一般是分布在上下2層,那么,液氮隨著消耗越來越少,上層的探頭離液氮越遠,溫度也就越高,這就可能造成上層的溫度超標,所以試驗時間的長短對溫度影響很大,同時我們也知道,液氮罐里的液氮是可以添加的,所以我們在驗證過程中不添加液氮,48h的數(shù)據(jù)如果合格,那么在試驗樣品保存中只要及時添加液氮,就不會出現(xiàn)樣品保存溫度過高的情況,杜絕溫度過高的影響。
4:液氮罐的氣密性
影響液氮消耗的還有一個就是氣密性,如果液氮罐的氣密性比較好,能夠有效的減少液氮的揮發(fā),而且保證液氮罐內氣相的穩(wěn)定,不會出現(xiàn)溫度急劇上升的情況。而這個在使用中可以通過罐口的“水霧"的多少來判斷,罐口無“水霧"或者很少都能說明氣密性不錯。
最后一個我認為比較重要的是開蓋時間,在開蓋的狀態(tài)下,液氮會大量揮發(fā),所以在開蓋取樣的過程中液氮的揮發(fā)造成的影響也需要考慮,取樣后的上層溫度在穩(wěn)定后是否合格,防止由于人員開蓋操作時間過長導致的溫度超標風險。
5:液氮罐在使用時,要經(jīng)常記錄液氮剩余量,也要及時補充液氮,那么什么時候補充液氮呢?如何測量液氮剩余量呢?
測量方法很簡單,使用探條測量液氮的深度就可以知道什么時候該充氮了,塑料桿作探條放入罐中一段時間,取出放在空氣中,探條上將出現(xiàn)一條箱線,這樣就可測得液氮的高度。如不及時充氮,液氮將耗盡。
另外一種方法是:先確定液氮罐的臨界重量(即該充氮時的重量),然后每隔一段時間稱一次,當與臨界重量相同時,就該充氮了。
6:為了細胞儲存環(huán)境達標,定期對液氮罐進行確認,部分液氮罐確認項目如下:
6.1對于能夠自動充氮的液氮罐應定期檢查電磁閥連接以及運行情況。
6.2液氮補充罐壓力是否在接受范圍內。
6.3 低液位報警功能測試。
6.4.高溫報警功能確認,建議和低液位報警測試一起測試,可有效節(jié)約確認時間。
6.5 溫度監(jiān)控探頭確認,對于氣相罐而言,液氮罐設備監(jiān)控探頭至少應有一個位于裝載區(qū)域靠近罐體部位置,若有多個監(jiān)控探頭的液氮罐,建議罐體部和底部至少放置一個探頭。
6.6 溫度分布測試,使用校準過的溫度監(jiān)控探頭在液氮罐內合理地均勻布置監(jiān)測點,統(tǒng)計液氮罐實際儲存條件下的溫度是否在可接受范圍內。
6.7 開蓋測試,模擬操作人員日常取細胞時對罐體的溫度影響,這項測試有助于規(guī)范液氮罐日常取樣操作流程,防止由于人員開蓋操作時間過長導致的溫度標風險。
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